二. 實(shí)驗(yàn)方法：

1．取孕16日齡的昆明雌性小白鼠，頸椎脫臼法處死之，先置于75%乙醇中粗洗一遍（2分鐘），再置于75%乙醇中消毒5分鐘；

2．用眼科剪以及止血鉗先剪開雌鼠的腹部皮膚，鈍性分離至兩側(cè)，充分暴露腹壁肌肉，然后小心剪開腹壁全層，切勿傷及內(nèi)臟及小鼠胚胎；

3．剪開子宮，從宮腔中取出胚胎鼠，置入無菌平皿中；

4．用雙抗-冷PBS將胚胎鼠體表洗滌兩次，每次１分鐘；

5．用顯微外科剪刀將胚胎鼠的腹壁剪開，再用顯微外科鑷子夾起鼠近胃端小腸（包括十二指腸和空腸），截取２cm左右；

6．用雙抗-冷PBS將胚胎鼠小腸連續(xù)洗滌兩次，每次1分鐘；

7．用顯微外科剪刀將腸管縱行切開，充分暴露粘膜面；

8．用雙抗-冷PBS將胚胎鼠小腸連續(xù)洗滌兩次，每次1分鐘；

9．將鼠小腸置于含雙抗（青、鏈）的MEM培養(yǎng)液中沖洗2次，每次1分鐘；

10．將鼠小腸剪成極小的器官型植塊，大小約1mm×1mm；

11．將植塊置于12孔培養(yǎng)板的培養(yǎng)孔中央，每孔5塊，間隔約2mm，布局合理，粘膜面向上，輕輕按壓每塊植塊，使其緊貼培養(yǎng)板的表面；

12．沿著培養(yǎng)孔的邊緣，每孔中加入約0.5ml的完全MEM培養(yǎng)液，勿使培養(yǎng)液與植塊接觸；

13．將培養(yǎng)板置于37，５％培養(yǎng)箱中預(yù)孵育１.5小時(shí)；

14．每孔加完全MEM培養(yǎng)液2ml，輕拿輕放，切勿使植塊飄起，實(shí)驗(yàn)組加GIC；

15．實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組同步等量換液，每次去掉原液的1/２左右, 再加入相同量的新鮮MEM培養(yǎng)液；

16．用倒置顯微鏡觀察植塊生長情況，用顯微成像記錄分析系統(tǒng)記錄所觀察的結(jié)果，并用計(jì)算機(jī)保存圖像。

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